Etude du role du complexe Smc5/6 dans le maintien des telomeres, de la terminaison de la transcription de l'ARN de la telomerase, et de la taille des telomeres dans la polyarthrite rhumatoide

Les telomeres sont des structures nucleoproteiques formees de sequences d'ADN repetees associees a des proteines specialisees assurant la protection des extremites des chromosomes eucaryotes et leur replication complete. La telomerase est une ribonucleoproteine catalysant l'ajout de repetitions telomerique pour contrer la perte de sequences inherente a la replication des extremites des chromosomes lineaires. Plusieurs facteurs jouent des roles importants dans le maintien de l'integrite des telomeres. Le champ d'etude de la biologie des telomeres est toujours en expansion, etant donne les liens etroits entre les telomeres, le cancer et le vieillissement. Les travaux presentes dans cette these se divisent en trois parties. Les deux premieres utilisent la levure Saccharomyces cerevisiae pour explorer les liens entre le complexe Smc5/6 et le maintien des telomeres, ainsi que les mecanismes de terminaison de transcription de la composante ARN de la telomerase (Tlc1). La troisieme partie est une etude epidemiologique preliminaire examinant la taille des telomeres de patients atteints de polyarthrite rhumatoide (PR).;Deuxiemement, il est etabli que l'abondance de la telomerase est critique pour l'homeostasie des telomeres. Mais le controle de l'expression de l'ARN Tlc1 est encore obscur. L'analyse des sequences en 3' du gene TLC1 revele des signaux reconnus par les 2 voies de terminaison de transcription par l'ARN polymerase II. Les resultats indiquent que la formation de Tlc1 est controlee par la voie de terminaison des petits ARNs non-codants Nrd1/Nab3. Tlc1 existe sous 2 formes, une majeure, non polyadenylee, presente dans la telomerase active, et une mineure, polyadenylee, dont le role est inconnu. Les donnees montrent que la synthese et la fonction de l'ARN Tlc1 mature ne necessitent pas la forme polyA+ comme precurseur. La terminaison dependante de la polyadenylation pourrait etre un mecanisme de surete pour arreter la transcription.;Troisiemement, plusieurs maladies sont associees a des defauts dans le maintien des telomeres. La PR est une maladie auto-immune causant une inflammation chronique et une destruction graduelle des articulations. Des etudes suggerent que les lymphocytes de patients atteints de PR auraient des telomeres anormalement courts. Ensuite, des marqueurs pronostiques fiables identifiant les patients qui developperont une arthrite persistante et severe font actuellement defaut, mais seraient utiles afin d'elaborer des traitements plus efficaces. Une etude epidemiologique a donc ete amorcee pour analyser l'erosion des telomeres des lymphocytes dans une cohorte de patients avec arthrite debutante et evaluer de potentielles correlations avec la progression et la severite de la maladie. Les resultats preliminaires obtenus par 3 techniques de mesure de la taille des telomeres (TRF, STELA et qPCR) sont incomplets, mais semblent indiquer un defaut dans le maintien des telomeres chez les patients. Les observations illustrent aussi les limites des etudes epidemiologiques longitudinales analysant la taille des telomeres.;Mots-cles: Telomeres, Telomerase, Replication, Transcription, Smc5, Nrd1, Tlc1, Polyarthrite rhumatoide.;Premierement, les proteines SMC (structural maintenance of chromosomes) forment 3 complexes conserves requis pour la transmission des chromosomes lors des divisions cellulaires. Le complexe Smc5/6 a ete implique dans la reparation de l'ADN et le maintien des telomeres. Les roles des complexes SMC, en particulier Smc5/6, dans la biologie des telomeres ont donc ete investigues. Les resultats montrent que les complexes SMC sont importants pour la survie pendant la senescence en absence de telomerase. Les donnees obtenues pour Smc5/6 supportent un modele dans lequel le complexe est requis pour la replication complete et la reparation adequate des chromosomes. De frequentes cassures d'ADN au niveau des repetitions telomeriques sont observees en absence du complexe, illustrant l'importance particuliere de Smc5/6 pour la separation des regions telomeriques.