Etude de la synthese des steroides dans les glandes surrenales et regulation par les UDP-glucuronosyl-transferases dans les tissus peripheriques (French text)

Cette these porte sur l'etude de l'expression d'enzymes-cles intervenant dans la biosynthese des hormones steroidiennes, ainsi que dans la secretion et la regulation et des steroides dans les organes cibles peripheriques. Visant une meilleure comprehension des pathologies humaines associees a la relation structure-fonction des enzymes regissant la synthese des steroides Delta4--Delta5, nous avons isole et caracterise, dans un modele de surrenales de cobaye qui est reconnu pour sa production de steroides C19, les ADNc codant pour la P450c17 et la P450c21. Le P450c17 possede les activites 17alpha-hydroxylase et 17,20-lyase qui sont actives uniquement sur les substrats du sentier Delta4. Le P450c21 est majoritairement actif envers la 17OH-Prog. Ces activites confirment la preference du sentier Delta4 chez cet animal pour la synthese des steroides C19. Les niveaux de steroides dans les tissus peripheriques sont egalement regules par des enzymes de detoxication telles que les UDP-glucuronosyltransferases. L'activite de conjugaison des UGTs sur les substrats endogenes et exogenes dans les tissus steroidiens et le tractus gastro-intestinal, suscitent un grand interet. Nous avons etudie l'activite et le role de la distribution tissulaire des UGTs humaines et simiennes dans l'elimination metabolique des antiestrogenes EM-652 et Raloxifene. Le Raloxifene, qui est conjugue principalement par des UGTs pre-systemiques dans le tractus gastro-intestinal differe du EM-652, qui est metabolise principalement par des UGTs situes dans le foie. Les profils de conjugaison pour une meme molecule peuvent differer selon les especes, tel qu'observe avec le EM-652. Les mutations retrouvees dans les UGTs ont un impact important sur la conjugaison des differents aglycones, ainsi que leur concentration residuelle en circulation. Nous avons evalue l'effet de la mutation P229Q de l'UGT1A1 (UGT1A1*27) sur la conjugaison du EM-652 et du Raloxifene. L'activite du variant envers ces substrats est drastiquement reduite. Nous avons egalement demontre l'impact de la mutation I211T sur l'activite globale d'UGT1A10. Ce residu s'est avere essentiel pour l'activite de cet UGT. L'absence d'activite de cette isoforme peut affecter la conjugaison de plusieurs substrats endogenes et exogenes au niveau du tractus gastro-intestinal. L'etude pharmacogenetique des polymorphismes des UGTs devient predominante dans la regulation des facteurs de risques des cancers, et de la variabilite interindividuelle relativement a la toxicite des medicaments.