Analyse quantitative de l'induction de fluorescence du photosysteme II: Energie d'activation apparente et origine de chaque phase

L'induction de fluorescence est une technique omnipresente en analyse photosynthetique de par le faible cout de l'appareillage, sa simplicite d'utilisation et la non-invasivite de la methode. De plus, il est autant possible d'analyser des feuilles que des isolations de materiel photosynthetique.; Cependant, un probleme persiste dans l'analyse des resultats des courbes d'induction de fluorescence: il y a peu de techniques d'analyse quantitative. En effet, dans la plupart des cas on analyse visuellement les courbes en comparant une courbe provenant d'un echantillon traite avec une courbe temoin. Ce type d'interpretation qualitative n'est pas tres precis et, d'un auteur a l'autre, ce qui est considere comme un changement significatif de la courbe d'induction de fluorescence peut etre different.; Le but du present projet etait de pallier a cette lacune dans l'analyse des courbes d'induction de fluorescence par le developpement d'une nouvelle technique d'analyse quantitative. Par le fait meme, une methode d'analyse quantitative des phases des courbes d'inductions de fluorescence permettrait une tentative d'identification de l'origine de chacune des phases qui y sont representees.; L'etude d'une technique quantitative d'analyse a requis la mise au point d'une cuvette maison ou la temperature est reglable precisement et de facon stable. C'etait la premiere phase du projet. Cela peut sembler simple, mais le controle efficace, stable et precis de la temperature dans une cuvette pouvant accueillir quatre millilitres de solution tout en etant egalement en mesure d'accepter la sonde du Plant Efficiency Analyser (PEA) de Hansatech s'est avere une tache ardue. En effet, plusieurs problemes d'ordre technique sont apparus tout au long du developpement de la cuvette.; Lorsque la cuvette fut finalement operationnelle, les experiences avec des membranes thylacoidiennes d'epinard temoins ont commence. Il fallait maintenant mettre au point la technique d'analyse quantitative. Tout d'abord, a la temperature piece, nous avons teste la decomposition des courbes d'induction de fluorescence en trois composantes exponentielles distinctes, representant trois cinetiques d'ordre 1, qui sont observees dans les courbes d'induction de fluorescence; les phases O-J, J-I et I-P. Cette etape a ete realisee a l'aide de regressions non-lineaires effectuees par le logiciel informatique SigmaPlot. La decomposition s'averant concluante, nous somme parvenus a determiner deux nouveaux parametres quantitatifs: l'amplitude et la demi-vie et ce pour chaque phase.; Nous avons voulu pousser plus loin l'analyse en calculant l'energie d'activation apparente de chaque phase de l'induction de fluorescence. C'est a cette etape que la cuvette thermoajustable est entree enjeu. En effet, en faisant varier la temperature, on peut tracer un graphique de la variation du logarithme des constantes de vitesse en fonction de l'inverse de la temperature et la pente de ce graphique nous donne acces a l'energie d'activation apparente de chaque phase.; Finalement, afin de tester notre nouvelle methode d'analyse quantitative, nous avons selectionne deux produits, le diuron (DCMU) et le decylplastoquinone (dPQ. Notre choix s'est arrete sur ces produits car leurs effets sont bien documentes dans la litterature: il sera donc aise de verifier si les resultats de l'analyse quantitative collent avec la theorie.; La methode s'est averee une bonne facon de decomposer les courbes d'induction de fluorescence afin d'en faire une analyse quantitative. En effet, nous pouvons obtenir une excellente reconstitution des courbes a partir des parametres d'amplitude et de temps de demi-vie trouves pour chacune des phases. Les resultats d'energie d'activation sont egalement tres interessants. Ces trois parametres quantitatifs nous ont permis, avec une bonne certitude, d'identifier l'origine de deux des trois phases de l'induction de fluorescence. Effectivement, la phase O-J semble dependre de la quantite reduite de...