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Mise en evidence de bacteries dans le sang de sujets sains a l'aide de technologies biomoleculaires

Posted on:2010-01-07Degree:M.ScType:Thesis
University:Universite du Quebec a Trois-Rivieres (Canada)Candidate:Nepveu-Traversy, Marie-EdithFull Text:PDF
GTID:2446390002489690Subject:Biology
Abstract/Summary:
L'avenement de la biologie moleculaire a permis de mettre en evidence et caracteriser plusieurs especes bacteriennes autrefois inconnues et ce, en raison de la difficulte a etudier des bacteries ne pouvant croitre en laboratoire. Seulement un faible pourcentage (<1%) de bacteries possede la capacite de croitre sur un milieu de culture. Des technologies, telle que la reaction de polymerisation en chaine, ont facilite la detection et la caracterisation de bacteries dans divers environnements. Comme par exemple l'estomac, que l'on croyait quasi-sterile, en raison de son pH acide, contient' plus de 128 phylotypes bacteriens. Differentes microflores ont ete caracterisees a l'aide de cette technologie et ces microflores se sont averees beaucoup plus nombreuses et complexes que l'on pensait. Etant donne que chez l'Homme, les seuls sites anatomiques consideres steriles sont les organes internes, l'idee d'y retrouver une microflore a ete prise en consideration. Deux etudes ont porte sur ce sujet et elles remettent effectivement en cause la sterilite du sang. De plus, differentes recherches ont demontre que plusieurs transfusions de sang, provenant de donneurs sains, ont cause des infections chez les receveurs. Le sang humain serait-il aussi sterile qu'on le croit? Pour y repondre, nous avons utilise trois technologies permettant de mettre en evidence la presence d'ADN bacterien dans le sang veineux de sujets sains: la PCR conventionnelle, la PCR quantitative et la trappe a promoteur bacterien. Pour demontrer la viabilite des bacteries, la PCR quantitative a ete utilisee sur des echantillons preleves au jour 0 et apres 5 jours d'incubation pour demontrer la croissance bacterienne. La PCR quantitative a permis d'obtenir des resultats demontrant une croissance suite a une incubation, mais l'absence d'une courbe standard ne nous permet pas de prendre ces resultats en consideration. Une trappe a promoteur bacterien a permis de mettre en evidence de l'ADN bacterien, similaire a 6 especes bacteriennes, dans le sang de 3 sujets sains. De plus, cette technologie a demontre que des sequences d'ADN humain ont la capacite d'interagir avec la machinerie de transcription bacterienne. Fait plutot surprenant, etant donne que le mecanisme de transcription differe passablement d'un organisme eucaryote a un organisme procaryote. Ceci nous montre a quel point le genome est tres peu connu. Certaines sequences d'ADN possedent peut etre des roles qui sont inconnus jusqu'a present. Pour la detection d'ADN bacterien dans le sang, on peut conclure que le sang humain contient de l'ADN bacterien. Par contre, la provenance reste inconnue: vestige du systeme immunitaire suite a l'entree de bacteries lors du prelevement ou presence d'une microflore dans le sang?;Mots cles. sterilite, microflore, sang, ADN bacterien, promoteur.
Keywords/Search Tags:Le sang, Dans le, De bacteries, En evidence, Bacterien, La PCR quantitative, Sujets sains, Mettre en
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