Etude du mecanisme de cardioprotection de la ceruloplasmine contre le stress oxydatif (French and English text)

Le but des travaux décrits dans cette thèse a été d'étudier le rôle protecteur de la céruloplasmine contre le stress oxydatif et de déterminer les mécanismes possibles de cette protection. Le modèle animal utilisé a été le coeur isolé de rat et les sources de l'radicaux libres oxygéńs (RLO), l'électrolyse et l'ischémie-reperfusion. Dans un premier temps, nous avons observé que la céruloplasmine montre un puissant effet protecteur de type dose-dépendant contre toutes les modifications biochimiques et cardiodynamiques induites dans le myocarde par les RLO générés durant l'électrolyse du tampon de perfusion. De plus, la céruloplasmine réduit de façon significative la fuite de la noradrénaline neuronale, induite par l'électrolyse, ce qui suggère qu'elle protège également les terminaisons des nerfs sympathiques. Dans une étude réalisée en parallèle in vitro et ex vivo (coeur isolé de rat), l'efficacité antioxydante de la céruloplasmine contre les RLO générés toujours par électrolyse, a été comparée avec celle d'autres antioxydants (la SOD, la catalase, le mannitol, l'albumine). Nous avons mis en évidence que la céruloplasmine présente la capacité antioxydante la plus élevée in vitro l'effet cardipprotecteur le plus puissant ex vivo et donc que ces deux types d'activité peuvent être corrélés.; Dans une deuxième étape, nous avons également mis en évidence l'action antifibrillatoire de la céruloplasmine native, dans des coeurs'isolés de rat soumis à un épisode d'ischémie-reperfusion. Nous avons également établi le rôle de l'intégrité conformationnelle de la céruloplasmine dans ce phénomène de cardioprotection qui semble être de type dose-effet. En ce qui concerne les mécanismes par lesquels la céruloplasmine exerce son action cardioprotectrice, nous avons remarqué qu'en plus de son action antioxydante, la céruloplasmine présente une action directe sur les propriétés électrophysiologiques de la membrane cellulaire. Ainsi, elle augmente d'une manière significative la période réfractaire effective (PRE) et la durée du potentiel d'action, calculée à des taux de repolarization de 50, 75, et 90% (DPA50, DPA75, DPA90), dans le coeur de rat. Les effets électrophysiologiques de la céruloplasmine, similaires aux effets des antiarythmiques de classe III, sont de type dose-dépendant, spécifiques et non reliés à son activité antioxydante, à son activité enzymatique et à son intégrité conformâtionnelle. Tout de même l'effet de la céruloplasmine sur la PRE ne peut pas totalement expliquer son action antifibrillatoire à la reperfusion, action qui dépend principalement de son activité antioxydante.; Dans une autre étude in vitro, nous avons comparé la capacité de la céruloplasmine de piéger directement les radicaux peroxyles, avec celle d'autres antioxydants. La céruloplasmine a démontré une capacité de piégeage nettement supérieure à celles de la SOD, de la déféroxamine et de l'albumine, et comparable à celle de la catalase. La technique de résonance paramagnétique électronique, a permis de mettre en évide...